Matériel
- Pattes de crabe vivant
- Matériels de dissection (ciseaux, pinces fines, épingles, cuve à dissection)
- Loupe binoculaire
- Microscope
- Lames de verre, lamelles, carrés de papier filtre
- Papier millimétré
- Pipettes pasteurs avec poire ou pipettes à usage unique
- Eau distillée
- Solution d’acide cyanhydrique
- Solution de CaCl2 à 5 %
- Gants et lunettes de protection
- Un appareil photo numérique (16 megapixels et zoom jusqu’à x5)
L’acide cyanhydrique est un inhibiteur de la synthèse d’ATP
Le chlorure de calcium provoque une contraction instantanée des fibres musculaires
Préparation de la solution d acide cyanhydrique : (attention, végétal toxique : porter gants et lunettes)
- Broyer pendant 2 min au mixer dans 10 ml de tampon phosphate-saccharose, 5g de feuilles de laurier –Cerise. Filtrer l’extrait qui contient l inhibiteur.
- Tampon phosphate – saccharose : 171g de saccharose+36.5g de Na2HPO4+16.6g de KH2PO4 pour 1L d’eau distillée
Une patte de crabe fraichement prélevée
Ouvrir la carapace sur un article de la patte de Crabe et extraire le muscle.
Prélever quelques fibres (les plus fines possibles) en dilacérant avec une épingle
Sous loupe binoculaire, ajouter de l’eau distillée avec une pipette plastique :
Sous loupe binoculaire, ajouter du chlorure de calcium (CaCl2) :
Sous binoculaire, ajouter l'acide cyanhydrique puis éponger un peu l’excès avec du papier filtre, puis ajouter le chlorure de calcium :
Sous microscope, ajouter par diffusion sous la lamelle une goutte de CaCl2 :
